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高效液相色譜儀在醫(yī)學(xué)臨床中的應(yīng)用應(yīng)用詳情

行業(yè)介紹

臨床醫(yī)學(xué)是研究疾病的病因、診斷、治療和預(yù)后,提高臨床治療水平,促進(jìn)人體健康的科學(xué)。臨床”即“親臨病床”之意,它根據(jù)病人的臨床表現(xiàn),從整體出發(fā)結(jié)合研究疾病的病因、發(fā)病機(jī)理和病理過程,進(jìn)而確定診斷,通過預(yù)防和治療以最大程度上減弱疾病、減輕病人痛苦、恢復(fù)病人健康、保護(hù)勞動力。臨床醫(yī)學(xué)是直接面對疾病、病人,對病人直接實(shí)施治療的科學(xué)。

 
反向高效液相色譜法

反向高效液相色譜法是色譜中的一種特種技術(shù)。應(yīng)用此法研究藥物在正常人體內(nèi)的藥動學(xué),具有簡便,迅速,準(zhǔn)確等特點(diǎn)。RP-HPLC-UV的分析檢測方法,該方法不需要特殊的設(shè)備,而且分析方法的穩(wěn)定性好,精密度高,時間段,過程簡單,可以作為藥物定量分析方法。自從反相高效液相色譜法應(yīng)用以來,有關(guān)此理論和實(shí)際應(yīng)用的文獻(xiàn)已經(jīng)大量出版。目前,反相高效液相色譜法已經(jīng)為許多實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)手段。 




用藥后的房水進(jìn)行定量測量


眼內(nèi)藥代動力學(xué)實(shí)驗(yàn):雙眼滴入眼液,將獲取的房水用反相高效液相色譜法進(jìn)行定量測量。結(jié)果滴眼后不同時間測定的房水中的藥物濃度不同,實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示局部點(diǎn)眼獲得的房水濃度低于對大多數(shù)真菌的最低抑菌濃度說明單獨(dú)點(diǎn)眼效果不好。所以應(yīng)配合全身用藥,改進(jìn)用藥途徑增加眼內(nèi)穿透力,以及增加點(diǎn)眼次數(shù)來克服此弊端。因此頻繁點(diǎn)眼也是增加眼內(nèi)穿透性,縮短病程的重要手段。病例病程較長滴眼次數(shù)過少可能事原因之一。
 

測量人體組織液中藥物濃度

采用乙酸乙酯直接提取血漿樣品,操作簡便,提取后樣品中雜質(zhì)干擾少,各藥物的萃取回收率高,均在75%以上,且通過有機(jī)溶劑的提取和濃縮,測定的靈敏度進(jìn)一步提高。由于乙酸乙酯比重較輕,與血漿混合后不易乳化,且液面處于上層,所以實(shí)驗(yàn)操作更方便。在進(jìn)行流動相條件篩選時,考察不同配比的分離效果,發(fā)現(xiàn)在甲醇:水﹙65:35﹚時,各色譜峰及內(nèi)標(biāo)間分離效果好,且峰形尖銳,柱效高,完成一次測定只需15min。㏎選擇230nm波長是經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)目標(biāo)成分在230nm紫外吸收系數(shù)均比較大,可以提高靈敏度。由于本方法流動相中無緩沖鹽和改性試劑,因此測試過程中平衡和沖洗色譜系統(tǒng)的時間比較短,有利于提高測定效果,更合適臨床應(yīng)用。

藥物腹腔注射在家兔房水中的藥代動力學(xué)研究
測定腹腔注射藥物后不同時間家兔房水中的質(zhì)量濃度,計(jì)算其藥代動力學(xué)參數(shù),研究藥代動力學(xué)特點(diǎn)。關(guān)于樣品的處理和流動相選擇,以甲醇處理樣品和選擇甲醇:水:磷酸緩沖液或甲醇:水為流動相的報(bào)道較多。也有選用高氯酸處理血樣和甲醇:水:冰醋酸為流動相的報(bào)道。我們采用高氯酸沉淀放水中的微量蛋白,一甲醇:水:冰醋酸=35:65:0.2為流動相,色譜柱為Diamonsil C18不銹鋼柱,在波長為250nm紫外光下對腹腔注射藥物量濃度的測定。通過高氯酸空白,防水空白和房水溶解藥物標(biāo)準(zhǔn)品對照測定,以及回收率測定為87.60%,日內(nèi)RSD為4.0%,日間RSD為5.32%,無其他峰干擾。結(jié)果表明,本方法具有特異,靈敏,快速等優(yōu)點(diǎn),使用于對房水藥物質(zhì)量濃度的測量。


藥物在玻璃體內(nèi)注射的藥代動力學(xué)研究

取玻璃體樣品,用反相高效液相色譜法測定玻璃體腔內(nèi)N質(zhì)量濃度。用DAS軟件計(jì)算主要的藥代動力學(xué)參數(shù)。 增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的治療主要是通過手術(shù)促使增生性病變的視網(wǎng)膜復(fù)位,但仍有10%左右的患者術(shù)后發(fā)生增殖性玻璃體視網(wǎng)病變。因?yàn)椴Aw手術(shù)雖然能切除已形成的增生膜,但不能完全取出增生細(xì)胞,甚至?xí)碳ぜ?xì)胞分化,增生,又形成增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變。所以,藥物防治增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變是非常必要的。近年來多種抗細(xì)胞增生藥或抗炎藥防治增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究取得了一些進(jìn)展,主要有抗腫瘤,抗過敏,降血壓,酪氨酸激酶抑制劑等,但是目前在臨床上仍無理想藥物可供使用。

 
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