RNA存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。
1、操作中戴口罩和手套
2、清潔無塵環境中操作,試驗臺、移液器要用75%乙醇擦拭消毒,也可使用RNase抑制劑,操作時避免大聲喧嘩和頻繁走動。
3、玻璃器皿常規洗滌后,應用0.1%焦磷酸二乙酯(DEPC)浸泡處理,然后再用滅菌雙蒸水漂洗幾次,高壓滅菌去除DEPC,160℃烘烤4h。
4、移液器槍頭和離心管要經DEPC處理水處理、高壓滅菌后使用。
5、提取后的總RNA定量后部分用于反轉錄,剩余RNA樣品標記并用封口膜封口后-80℃可保存數月。
6、配置0.1PC處理水 DEPC是一種強烈但不徹底的RNA酶抑制劑,常用濃度為0.1%。1L配方:DEPC 1ml,蒸餾水 1L,搖床過夜,高壓滅菌30min。
艾塔自主研發的一種先進、快速、高效提取DNA、RNA和蛋白質的樣品處理系統,能將任何來源(包括土壤植物和動物的組織/器官、細菌、真菌、孢子、古生物標本等)的DNA、RNA的蛋白質進行提取。使用方便,一次可以處理,1-24個樣本,可在20秒內完成破碎和裂解,最大限度的避免核酸的降解和蛋白質的解離。高效的振蕩,保證樣品被全方位地充分破碎。
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