在液相色譜分離條件中，重要的參數就是洗脫條件，其中分離條件又分為等度洗脫和梯度洗脫。

等度洗脫定義：液相色譜操作中，等度洗脫即在樣品組分的分析周期中，流動相的組成比例和流速恒定不變的洗脫方式。與梯度洗脫對應。

梯度洗脫定義：梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。

在色譜分析時，等度洗脫和梯度洗脫各有優(yōu)點和劣勢。

等度洗脫:

優(yōu)點

對于等度洗脫而言，由于方法運行時，流動相的比例不發(fā)生變化，所以它對儀器的要求不高，需要一個單元泵就可以運行方法。

其次，由于等度洗脫條件單一，所以比較容易用來摸索方法設置，例如改變流動相比例，改變柱溫等條件。

并且由于等度洗脫每次運行時的流動相比例相同，所以相同方法運行多個樣品時，樣品之間不需要設置平衡時間來讓系統恢復到所需的流動相比例。

缺點

但是它也有缺點，那就是越往后出峰的組分色譜峰越寬。

并且大多數等度洗脫的方法分析時間較長。

梯度洗脫:

優(yōu)點

而梯度洗脫能夠規(guī)避掉等度洗脫的問題，峰型得到改，很少拖尾。例如梯度洗脫的樣品峰，無論先出峰還是后出峰的組分，它們的峰形基本能保尖銳對稱。

其次由于梯度洗脫通常設置的流動相比例是讓洗脫強度越來越強，這樣能保在較短的時間內，讓樣品中強保留組分也能被洗脫出來。

缺點

但是伴隨著這些優(yōu)點也會有對應的缺點，先它對儀器的配置要求較高，通常需要配置四元泵或者二元泵。

其次它在每次運行樣品之間，需要設置的平衡時間，來讓系統中流動相的比例到達初始流動相比例。

之后，由于它的方法設置復雜，例如影響分離的有初始流動相比例、流動相的梯度變化、結束流動相比例、柱溫箱溫度等，所以方法的開發(fā)和優(yōu)化會較為復雜。而且有時引起基線漂移。

其實只做一兩個化合物，是等度洗脫好，速度快，但也并非越快越好，特別在分析生物樣品時，考慮到基質效應，保留因子控制在2-3左右較好。梯度洗脫適合分析多個結構不同的物質，如化合物與代謝產物一同鑒定的時候，比如苷和苷元的一同測定。另外很多做合成化學的分析實驗室用的也是一通用的梯度洗脫方法，一個方法搞定大部分樣品。一般來說對于組成簡單的樣品可以采用等度洗脫，而對于那些復雜的樣品分離通常需要進行梯度洗脫。

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