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如何區(qū)分細(xì)胞破碎儀的破碎方法?

發(fā)布時(shí)間:2023-08-02瀏覽:694

按照是否存在外加作用力,細(xì)胞破碎儀的破碎方法可分為機(jī)械法和非機(jī)械法兩大類。機(jī)械破碎中細(xì)胞所受的機(jī)械作用力主要有壓縮力和剪切力,非機(jī)械破碎主要利用化學(xué)或生化試劑(如酶)改變細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)而釋放胞內(nèi)物質(zhì)。

細(xì)胞破碎儀機(jī)械破碎法

通過(guò)機(jī)械運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的剪切力的作用,使細(xì)胞破碎的方法稱為機(jī)械破碎法。機(jī)械破碎法是工業(yè)規(guī)模細(xì)胞破碎的主要手段,具有處理量大,破碎效率高,速度快等特點(diǎn),適用于植物材料和細(xì)菌細(xì)胞的破碎。按照所使用的破碎機(jī)械的不同,可以分為搗碎法,珠磨法,勻漿法和超聲波破碎法等。

1,細(xì)胞破碎儀搗碎法。利用搗碎機(jī)高速旋轉(zhuǎn)葉片鎖產(chǎn)生的剪切力將組織細(xì)胞破碎,是一種較劇烈的破碎細(xì)胞的方法。通常可先用家用食品加工機(jī)將組織打碎,然后再用10000~20000r/min的內(nèi)刀式組織搗碎機(jī)(即高速分散器)將組織的細(xì)胞打碎,為了防止發(fā)熱或升溫過(guò)高,通常是轉(zhuǎn)10~20s,停10~20s,可反復(fù)多次。

搗碎法適用于動(dòng)物組織,內(nèi)臟,植物種子,嫩菜葉,較柔軟的果蔬等材料的破碎。但由于旋轉(zhuǎn)刀片的機(jī)械剪切力較大且破碎過(guò)程中溫度易迅速上升,不適于核酸等生物大分子的提取。

2,細(xì)胞破碎儀琢磨法。琢磨是一種常用的機(jī)械破碎細(xì)胞的方法,將玻璃小珠與細(xì)胞懸浮液一起快速攪拌。由于研磨作用,使細(xì)胞獲得破碎,常用的工業(yè)設(shè)備是高速珠磨機(jī)。該法適用于絕大多數(shù)微生物細(xì)胞的破碎。如采用高速濕法珠磨分離純化重組人腫瘤壞死因子時(shí),菌體經(jīng)間歇式珠磨機(jī)破碎3min,玻璃珠直徑為0.25~0.50mm,裝珠量為破碎室總體積的85%,攪拌轉(zhuǎn)速1500r/min,破碎液于4攝氏度,15000r/min離心15min后去除細(xì)胞碎片。本條件下,目標(biāo)蛋白回收率可達(dá)90.3%,活性回收率為85.8%。

3,細(xì)胞破碎儀高壓勻漿法。高壓勻漿破碎又稱高壓剪切破碎法。其破碎原理是:細(xì)胞懸浮液在高壓作用下從閥座與閥之間的環(huán)隙高速噴出后撞擊到碰撞環(huán)上,細(xì)胞在受到高速撞擊作用后,急劇釋放到低壓環(huán)境,從而在撞擊力和剪切力等的綜合作用下破碎。

高效組織細(xì)胞樣品處理系統(tǒng)(細(xì)胞破碎儀),是艾塔自主研發(fā)的一種先進(jìn)、快速、高效提取DNA、RNA和蛋白質(zhì)的樣品處理系統(tǒng),能將任何來(lái)源(包括土壤植物和動(dòng)物的組織/器官、細(xì)菌、真菌、孢子、古生物標(biāo)本等)的DNA、RNA的蛋白質(zhì)進(jìn)行提取。使用方便,一次可以處理,1-24個(gè)樣本,可在20秒內(nèi)完成破碎和裂解,最大限度的避免核酸的降解和蛋白質(zhì)的解離。高效的振蕩,保證樣品被全方位地充分破碎。

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