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高效液相色譜法與經典液相色譜法有什么區別?

發布時間:2023-03-10瀏覽:778

一、類型不同
 
1、高效液相色譜法
 
1)吸附色譜法(Adsorption Chromatography)
 
2)分配色譜法(Partition Chromatography)
 
3)離子色譜法(Ion Chromatography)
 
4)分子排阻色譜法/凝膠色譜法(Size Exclusion Chromatography)
 
5)鍵合相色譜法(bonded-phase chromatography)
 
6)親和色譜法(Affinity Chromatography)
 
2、經典液相色譜法
 
1)吸附色譜法
 
吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的,不進入固定相的內部。
 
2)分配色譜法
 
這種色譜的流動相和固定相都是液體,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數的差異進行分離,類似于萃取過程。
 
3)離子交換色譜
 
離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換,由于各組分離子的交換能力不同,從而達到色譜的分離。
 
向左轉|向右轉
 
 
二、特點不同
 
1、高效液相色譜法
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
 
②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。
 
③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
 
2、經典液相色譜法
以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。
 
三、應用不同
 
1、高效液相色譜法
 
由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域,并已成為解決生化分析問題最有前途的方法。
 
2、經典液相色譜法
 
液相色譜是常溫操作,不受樣品揮發度和熱穩定性的限制,它非常適合相對分子量較大,難汽化,不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物和高聚物的分離分析,大約占有機物的70%~80%。
 
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